鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑(NaOH+CuSO4),發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng),那么什么是雙縮脲試劑呢?一起隨小編來(lái)看看吧。
雙縮脲是一種有機(jī)化合物,分子式NH2-CO-NH-CO-NH2,那么什么是雙縮脲試劑呢?下面就一起隨佰佰安全網(wǎng)小編來(lái)了解一下吧。
雙縮脲試劑是一種用于鑒定蛋白質(zhì)的分析化學(xué)試劑。它是一種堿性的含銅試液,呈藍(lán)色,由0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制而成。會(huì)遇到蛋白質(zhì)顯紫色。
雙縮脲試劑本是用來(lái)檢測(cè)雙縮脲,由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此也能與銅離子在堿性溶液中發(fā)生雙縮脲反應(yīng)。當(dāng)?shù)孜镏泻须逆I時(shí)(多肽),試液中的銅與多肽配位,絡(luò)合物呈紫色??赏ㄟ^(guò)比色法分析濃度,在紫外可見(jiàn)光譜中的波長(zhǎng)為540nm。鑒定反應(yīng)的靈敏度為5-160mg/ml。
雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅,而氫氧化鉀僅僅是為了提供堿性環(huán)境,因此它可被其他堿,如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀,會(huì)延長(zhǎng)試劑的使用壽命。酒石酸鉀鈉的作用是保護(hù)反應(yīng)生成的絡(luò)離子不被析出變?yōu)槌恋?從而使試劑失效。
需要注意的是,能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)的化合物分子中至少含有兩個(gè)肽鍵。因此,二肽無(wú)法用它來(lái)檢驗(yàn)。
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